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DTNB介绍及应用

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2008-03-20T00:00 (访问量:10160)

DTNB介绍及应用(DTNB Ellman’s Reagent)

产品描述:

DTNBEllman试剂。它用于比色法测定生物样品中巯基。它易溶于水。在巯基化合物的存在下,无色的DTNB将被转变成黄  色的5-巯基-2-硝基苯甲酸。由于5-巯基-2-硝基苯甲酸在412 nm处具有最大吸收,DTNB的吸收光谱并不干扰巯基的测定。   

配置方法:

准确称取0.198gDTNB50mMNa2HPO4pH7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,于暗处低温保存备用。应该注意的是配置缓冲、浓度,储存时要避免见光。      

应用举例:

      半胱氨酸中自由巯基的定量检测方法
        
一、试剂的配制:

1TrisHCL缓冲液(0.25M):DDW准确配制后,用盐酸调节pH8.3

2、半胱氨酸标准溶液(1mM):准确称取0.017563gL-半胱氨酸(175.63),用1ml甲酸溶解,以DDW定容至100ml

3DTNB(分子量:396.35)标准溶液(10mM):准确称取0.198175gDTNB50mMNa2HPO4pH7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,于暗处低温保存备用:

4DTNB分析溶液(0.1mM):由1体积10mMDTNB标准液加99体积0.25MTris缓冲液配制而成,现用现配。

二、标准曲线的制作;

125℃条件下,用Tris缓冲液稀释半胱氨酸标准液配成梯度的稀释液(5.0ml),其浓度分别为:0.00mM0.025mM0.05mM0.1mM0.15mM0.2mM

2、取上述各浓度溶液1ml分别加入到5ml预先恒温于25℃水中的DTNB分析溶液,摇匀,准确静止10min,立即于波长412nm处测定吸光度值(A)。根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可

前尘公司提供的DTNB相关参数:

Product Name:DTNB

Product Number:D8130

Product Brand:Sigma

CAS Number:69-78-3

Molecular Formula:[-SC6H3(NO2)CO2H]2

Molecular Weight:396.35

APPEARANCE:YELLOW POWDER

SOLUBILITY:CLEAR YELLOW TO YELLOW-GREEN SOLUTION

AT 40MG PLUS 5ML OF ETHANOL

IR SPECTRUM:CONSISTENT WITH STRUCTURE

PURITY BY THIN LAYER CHROMATOGRAPHY:NLT 98%

SUITABILITY:SUITABLE FOR USE AS A REAGENT IN SULFHYDRYL

GROUP DETERMINATION

RECOMMENDED RETEST:5 YEARS

    5g售价优惠价:558    原料厂家和经销商,量大请直接联系:13918775203

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